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Gatinhos recém-nascidos machos e fêmeas podem ser difíceis de distinguir. Saber a diferença é importante para criadores, especialmente se novos donos potenciais procuram adotar gatinha fêmea em vez de macho ou vice-versa.
Ao nascer, todos os gatinhos devem ser verificados para duas aberturas sob a cauda: um ânus e uma marcando os genitais. Gatinhos com apenas uma abertura devem ser vistos por veterinário imediatamente, pois é situação de risco de vida.
Uma vez que os gatinhos atingem certa idade, geralmente por volta de 4 a 6 semanas, fica mais fácil determinar a diferença entre os dois.
Ao nascer, as duas aberturas abaixo da cauda estão mais afastadas entre si em comparação a uma gatinha fêmea. Aos 6 semanas, os testículos de um gatinho macho podem ser sentidos.
Em gatinhas fêmeas, as duas aberturas estão mais próximas. A gatinha também apresenta uma fenda vertical representando a vagina, em contraste com a abertura circular para o pênis do gatinho macho.
Em alguns casos, gatinhos podem ser diferenciados por cores. Gatinhos tartaruga (tortoiseshell) e calico são altamente prováveis de serem fêmeas. Enquanto gatinhos laranja tendem a ser machos. No entanto, gatinhos ainda devem ser verificados, pois é possível essas cores ocorrerem no sexo oposto.