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Veterinários, em conjunto com criadores, realizam série de testes no sêmen de cães reprodutores antes da cobertura. Como a taxa de cobertura do macho muitas vezes depende do número de filhotes que ele gera com sucesso, testes de fertilidade são necessários para qualquer programa de criação bem-sucedido. Idade, saúde geral e frequência de ejaculação influenciam o número de espermatozoides produzidos. Avaliação de fertilidade indica a probabilidade de o macho prenhar a fêmea e ajuda a determinar quando aposentar o reprodutor envelhecido.
Veterinários costumam usar uma fêmea "teaser" (em cio) para estimular a ereção do macho. Após permitir a monta, o vet posiciona o pênis para entrar em vagina artificial — tubo plástico especial aquecido à temperatura corporal do cão. O macho ejacula na vagina artificial e o sêmen coletado é mantido aquecido para análise laboratorial.
O veterinário inicia usando um hemocitômetro — instrumento portátil que usa fórmulas matemáticas para contar células em área específica. Dilui pequena porção do sêmen com reagente específico do fabricante; diluições variam entre marcas. Após colocar amostra diluída na câmara do hemocitômetro, multiplica o número de células no quadrado central milimétrico para calcular total de espermatozoides por ejaculado. Contagem normal em cães: 200 a 2.000 milhões de espermatozoides por ejaculação.
Avaliação espermática veterinária inclui outros testes para determinar fertilidade completamente. Contagem alta de leucócitos (células brancas) pode indicar infecção que reduz contagem espermática; contados também no hemocitômetro. Normal: menos de 2.000 por mililitro. Verifica-se também motilidade (movimento no fluido seminal), morfologia (anomalias de tamanho, forma e aparência que tornariam o espermatozoide ineficaz) e fosfatase alcalina do plasma seminal. ALP é enzima presente na corrente sanguínea, mas baixa concentração no sêmen indica ejaculação incompleta ou obstrução do ducto deferente. Outros testes podem incluir busca de bactérias/vírus causadores de infertilidade.