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Onças-pintadas habitam selvas, florestas, matas e savanas na América Central e do Sul, incluindo a floresta amazônica, o Pantanal, o Gran Chaco, florestas de névoa andinas e manguezais costeiros brasileiros. Preferem vegetação densa que fornece cobertura para emboscar presas. O território de cada onça pode variar de 25 a 100 km².
Perda de habitat por desmatamento, agricultura e assentamentos humanos é uma das maiores ameaças às onças. Esforços de conservação focam em áreas protegidas, uso sustentável da terra e educação comunitária.