Técnicas de Cultura de Tecidos

Cultura de tecidos é uma divisão da ciência natural na qual fragmentos de tecidos de plantas e animais superiores são cultivados fora de um organismo vivo. Com técnicas de cultura de tecidos, tecidos ou células são multiplicados em condições artificialmente induzidas que envolvem um substrato sólido como vidro ou celofane (ou seja, filme plástico) e um meio nutritivo complexo para a sustentação das células. Cultura de tecidos também é possível em suspensão líquida. Técnicas de cultura de tecidos encontram aplicação no estudo de biologia celular, bem como pesquisa de câncer e estudos de vírus.

Tipos de Células Cultivadas

Cultura de tecidos é um termo geral usado para significar tanto cultura de órgãos quanto cultura de células. Culturas de células usam células vivas removidas de um organismo e colocadas em um meio para cultura de tecidos. Dois tipos de capelas de fluxo laminar (ou seja, verticais e horizontais) são usados cuja função é remover particulados do ar, direcionando para um meio cultivado. As células são propagadas na presença de dióxido de carbono porque a suspensão líquida é tratada de tempos em tempos com bicarbonato de sódio ou ácido carbônico para que seu pH permaneça o mesmo. Um microscópio eletrônico é usado para visualizar as células.

Preservação

Nitrogênio líquido é usado para a preservação de células cultivadas. Ocasionalmente, vapor de nitrogênio é usado, mas nunca nitrogênio de congelamento. Nitrogênio de congelamento contém cristais de nitrogênio líquido que podem ser prejudiciais à integridade de células cultivadas porque altera a concentração de eletrólitos, desidratação e pH. Para manter nitrogênio líquido ou vaporizado de atingir ponto de congelamento, várias precauções são tomadas. Por exemplo, um agente crioprotetor (ou seja, glicerol ou dimetil sulfóxido) é usado para proteger contra os efeitos deletérios do congelamento. A temperatura das células em um meio de cultura é mantida próxima ao ponto de fusão do nitrogênio porque, abaixo de -130 graus C, o crescimento de cristais de nitrogênio é retardado.

Considerações de Segurança

Precauções de segurança são parte integral das técnicas de cultura de tecidos porque todas as culturas são uma fonte latente de vírus e outros microrganismos nocivos. Não coma, beba ou fume nas dependências do laboratório porque germes perigosos podem entrar em seu corpo, o que pode significar grandes problemas para seus órgãos internos. Limpe adequadamente suas mãos após experimentos e antes de sair do laboratório. Os pisos devem ser esterilizados com desinfetantes. Use capelas de fluxo laminar sempre que experimentar com substâncias perigosas. Isso impedirá microrganismos de escapar para espaços habitados.