Na natureza, a maioria dos ratos come qualquer vegetação disponível, incluindo frutas e sementes caídas. Dependendo da estação e da região onde vivem, isso pode incluir desde cascas de árvores até bulbos, raízes, aveia, milho, batatas e feijão-preto. No inverno, os ratos cavam a neve para alcançar grama ou brotos.
Certas espécies, como o rato-de-pé-branco, são onívoras e comem insetos ou restos de carne, se disponíveis. O rato-gafanhoto é quase exclusivamente carnívoro. Não apenas come carne, mas também é um excelente caçador, alimentando-se principalmente de gafanhotos, pequenos insetos e até pequenos mamíferos ou outros roedores.
Ratos que vivem no campo, perto de fazendas ou plantações, costumam se aproximar de lixo ou restos de alimentos. Se houver cultivo de milho, trigo ou outras culturas "aéreas", eles provavelmente se alimentarão delas. Como conseguem passar por aberturas muito pequenas, também podem acessar sementes, bulbos ou culturas armazenadas ou em secagem.
Ratos de estimação devem ser alimentados com ração peletizada comercial ou sementes limpas, que contenham todos os nutrientes necessários para saúde ótima. A dieta deve ser complementada com vegetais frescos, pois os ratos às vezes resistem a beber água e os vegetais fornecem líquidos suficientes para mantê-los hidratados.
Certos alimentos, incluindo alguns vegetais comuns, são venenosos para ratos e nunca devem ser dados a ratos de estimação, especialmente filhotes. Abacate é especialmente tóxico, mas sementes de mostarda, doces, grãos de café e chocolate podem ser igualmente perigosos, dependendo da quantidade e concentração.